Spisu treści:
Wideo: Lego Minecraft Movie 2024
Istnieje kilka różnych plam, które można wykorzystać do wizualizacji i sfotografowania DNA po rozdzieleniu materiału za pomocą elektroforezy żelowej. Wśród wielu wyborów, te pięć szczepów jest najczęstszym początkiem z bromkiem etydyny, który jest najczęściej stosowany. Podczas pracy z tym procesem ważne jest nie tylko poznanie różnic między szczepami, ale także związanych z nimi zagrożeń dla zdrowia.
01 Bromek etydyny
Bromek etydyny jest prawdopodobnie najbardziej znanym barwnikiem stosowanym do wizualizacji DNA. Może być stosowany w mieszaninie żelu, buforze do elektroforezy lub w celu barwienia żelu po jego uruchomieniu. Cząsteczki barwnika przylegają do nici DNA i fluoryzują w świetle UV, pokazując dokładnie, gdzie pasma znajdują się w żelu. Pomimo swojej przewagi, wadą jest to, że bromek etydyny jest potencjalnym czynnikiem rakotwórczym, dlatego należy obchodzić się z nim bardzo ostrożnie.
02 SYBR Gold
Barwnik SYBR Gold może być stosowany do barwienia podwójnego lub jednoniciowego DNA lub do barwienia RNA. SYBR Gold trafia na rynek jako jedna z pierwszych alternatyw dla bromku etydyny i jest uważana za bardziej wrażliwą. Barwnik wykazuje 1000-krotnie większą fluorescencję UV po związaniu z kwasami nukleinowymi. Następnie przenika do grubych i wysokoprocentowych żeli agarozowych i może być stosowany w żelach formaldehydowych.
Ponieważ fluorescencja niezwiązanej cząsteczki jest tak niska, odbarwianie nie jest wymagane. Posiadacz licencji Molecular Probes również (od czasu uruchomienia SYBR Gold) opracował i sprzedawał SYBR Safe i SYBR Green, które są bezpieczniejszą alternatywą dla bromku etydyny.
03 SYBR Green
Barwniki SYBR Green I i II (ponownie wprowadzone na rynek przez Molecular Probes) są zoptymalizowane do różnych celów. Ponieważ wiążą się one z DNA, nadal są uważane za potencjalne mutageny iz tego powodu powinny być traktowane ostrożnie. SYBR Green I jest bardziej czuły w użyciu z dwuniciowym DNA, natomiast SYBR Green II jest najlepszy do stosowania z jednoniciowym DNA lub RNA. Podobnie jak popularne bejce bromku etydyny, te bardzo wrażliwe plamy fluoryzują w świetle UV.
04 SYBR Safe
SYBR Safe został zaprojektowany jako bezpieczniejsza alternatywa dla bromków etydyny i innych bejm SYBR. Nie jest on uważany za odpad niebezpieczny i można go z reguły usunąć za pomocą zwykłych systemów kanalizacyjnych (tj. Odpływu), ponieważ badania toksyczności wskazują, że nie ma ostrej toksyczności. Badanie wskazuje również na niewielki lub żaden genotoksyczność na komórkach Syrian Hamster Embryo (SHE), ludzkich limfocytach, mysich komórkach chłoniaka iw teście AMES. Barwnik można stosować z transiluminatorem z niebieskim światłem, który powoduje mniejsze uszkodzenie wizualizowanego DNA i oferuje lepszą skuteczność do późniejszego klonowania.
05 Eva Green
Eva Green to zielony barwnik fluorescencyjny, który, jak stwierdzono, hamuje reakcję łańcuchową polimerazy (PCR) w mniejszym stopniu niż inne barwniki. Dzięki temu jest bardzo przydatny w zastosowaniach takich jak ilościowy PCR w czasie rzeczywistym. Jest to również dobry wybór, jeśli używasz żeli o niskiej temperaturze topnienia do odzyskiwania DNA. Jest bardzo stabilny w wysokich temperaturach i sam ma bardzo niską fluorescencję, ale jest wysoce fluorescencyjny po związaniu z DNA. Wykazano również, że Eva Green ma bardzo małą lub żadną cytotoksyczność lub mutagenność.
Bycie żonatym i wspólne składanie podatków
Status złożenia wniosku o zawarcie małżeństwa zapewnia więcej korzyści podatkowych niż składanie osobnych deklaracji, ale ma również pewne wady.
Które firmy brokerskie mają najlepsze wspólne fundusze?
Szukając najlepszych firm brokerskich do kupowania funduszy inwestycyjnych typu "bez obciążenia", należy również sprawdzić współczynniki niskiego wydatku i brak opłaty transakcyjnej (NTF).
Jak spadkowy wpływ na nieruchomości najemców wspólne
Dowiedz się, jaka jest wspólna dzierżawa, jeśli najemcy we wspólnej nieruchomości wymagają spadków i dziedziczą majątek będący własnością najemców.