Spisu treści:
- Przygotuj zapasowy roztwór EDTA
- Przygotuj zapasowe rozwiązanie TAE
- Przygotuj roztwór roboczy TAE
- Czego potrzebujesz do bufora
- Zawijanie
Wideo: Podłączenie pieca do bufora - Budowa Domu Jednorodzinnego.pl 2024
Bufor TAE jest roztworem złożonym z zasady Tris, kwasu octowego i EDTA (octan Tris-EDTA). Jest to historycznie najpopularniejszy bufor stosowany do elektroforezy w żelu agarozowym w analizie produktów DNA powstałych w wyniku amplifikacji PCR, protokołów oczyszczania DNA lub eksperymentów klonowania DNA.
Ten bufor ma niską siłę jonową i niską zdolność buforowania. Najlepiej nadaje się do elektroforezy dużych (> 20 kb) kawałków DNA i będzie wymagać częstej wymiany lub recyrkulacji na dłużej (> 4 godziny) czasu żelowania. Mając to na uwadze, warto rozważyć kilka partii bufora.
Biorąc pod uwagę, że bufor jest łatwy do wykonania, a kroki można wykonać szybko, wykonanie więcej niż jednej partii na raz nie powinno być szczególnie czasochłonne lub trudne do zniesienia. Korzystając z poniższych instrukcji, zrobienie bufora TAE powinno zająć tylko 30 minut. Oto jak:
Przygotuj zapasowy roztwór EDTA
Roztwór EDTA (kwas etylenodiaminotetraoctowy) przygotowuje się z wyprzedzeniem. EDTA nie przejdzie całkowicie do roztworu, dopóki pH nie zostanie ustawione na około 8,0. Dla 500-mililitrowego roztworu podstawowego 0,5 M EDTA odważ 93,05 gramów soli disodowej EDTA (FW = 372,2). Rozpuścić w 400-mililitrowej dejonizowanej wodzie i dostosować pH za pomocą wodorotlenku sodu (NaOH). Uzupełnij roztwór do końcowej objętości 500 mililitrów.
Przygotuj zapasowe rozwiązanie TAE
Stwórz stężony (50x) roztwór podstawowy TAE przez odważenie 242 gramów zasady Tris (FW = 121,14) i rozpuszczenie jej w około 750 ml dejonizowanej wody. Ostrożnie dodać 57,1 mililitrów kwasu glacjalnego i 100 mililitrów 0,5 M EDTA (pH 8,0). Następnie dostosuj roztwór do końcowej objętości 1 litra. Ten roztwór podstawowy można przechowywać w temperaturze pokojowej. Wartość pH tego buforu nie jest skorygowana i powinna wynosić około 8,5.
Przygotuj roztwór roboczy TAE
Roztwór roboczy 1x buforu TAE wytwarza się przez proste rozcieńczenie roztworu podstawowego o 50 x w wodzie dejonizowanej. Końcowe stężenia substancji rozpuszczonej wynoszą 40 mM. Octan Tris i 1 mM EDTA. Bufor jest teraz gotowy do użycia w prowadzeniu żelu agarozowego.
Czego potrzebujesz do bufora
Ponieważ wykonanie bufora TAE wymaga jedynie szybkiego i prostego zestawu instrukcji, liczba potrzebnych do tego materiałów nie jest nadmierna. Będziesz potrzebował tylko soli disodowej EDTA, zasady Tris i lodowatego kwasu octowego.
Wykonanie bufora wymaga również odpowiednio pomiaru pH i standardów kalibracji. Będziesz także potrzebował 600 mililitrów i 1500 mililitrów zlewek lub kolb oraz cylindrów miarowych. Na koniec potrzebna będzie dejonizowana woda, mieszadła i mieszadła.
Zawijanie
Gdzie zamierzasz wykonać bufor - w szkole, miejscu pracy lub w innej lokalizacji, na przykład w domu? Sprawdź ekwipunek zanim zaczniesz się upewnić, że masz wszystkie powyższe materiały do bufora TAE.
Jeśli wolisz nie płacić za materiały, zaleca się ustawienie bufora poza domem. Możesz łatwo zamówić potrzebne materiały online lub odwiedzić sklep specjalistyczny.
Dowiedz się, co zrobić z RSU na formularzu W-2
Dowiedz się, co zrobić, gdy zobaczysz słowo "RSU" w polu 14 formularza W-2 z kwotą dolara obok. Oto, jak poradzić sobie z tymi informacjami na temat zeznania podatkowego.
Dowiedz się, jak znaleźć aukcje MLS i zrobić wyszukiwania MLS
MLS oznacza "usługa wielu aukcji." Dowiedz się, jak uzyskać dostęp do wyszukiwania domu MLS i znaleźć wykazy MLS na danym obszarze, które są aktualne.
Jak zrobić bufor TBE w 3 łatwych krokach
Skorzystaj z tych prostych instrukcji, aby przygotować zapasowe i robocze roztwory buforu TBE (tris-boran-EDTA) do rozdziału elektroforetycznego w żelu DNA.